豬流感病毒H1N1亞型檢測試劑盒使用步驟

豬流感病毒H1N1亞型檢測試劑盒（PCR法）

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產(chǎn)品名稱：豬流感病毒H1N1亞型檢測試劑盒（PCR法）規(guī)格分類：PCR-熒光探針法試劑盒
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)*。
用途：生化實(shí)驗(yàn)，合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
豬流感病毒H1N1亞型檢測試劑盒（PCR法）規(guī)格【目的】
本試劑盒適用于檢測病禽肺臟、*等組織、體液或淋巴結(jié)等標(biāo)本以及細(xì)胞培養(yǎng)液中禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)RNA，適用于禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查，其檢測結(jié)果僅供參考。
【原理】
本試劑盒用一對新城疫病毒特異性引物，結(jié)合一條特異性探針，用一步法熒光RT-PCR技術(shù)對新城疫病毒RNA進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測，用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)診斷。
【儲存條件】-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
【試劑規(guī)格及有效期】48 T/盒，有效期12個(gè)月。說明：不同批號的試劑組分不可交互使用。
【適用儀器】取得資格認(rèn)證的熒光定量PCR儀。
實(shí)驗(yàn)原理：
多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction, PCR）基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性、退火、延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。
1. 模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；
2. 模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合；
3. 引物的延伸：DNA模板－引物結(jié)合物在Taq DNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性、退火、延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈"，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘， 2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)增的目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。